一方、龍之助は、御嶽山の奉納試合の相手・字津木文之丞の許嫁・お浜（中村玉緒）から、勝ちを譲るよう頼まれるが、これを断り、試合の中で文之丞を斬り倒す。そして水車小屋で悲嘆に暮れるお浜の操を奪った龍之助は、お浜を妻として共に江戸へ向かう。江戸で龍之助は新徴組に出入りし、近藤勇（菅原謙二）、芹沢鴨（根上淳）、土方歳三（千葉敏郎）らと知り合う。文之丞の訃報を知った弟の兵馬（本郷功次郎）は、龍之助の妖剣を討つべく、剣聖・島田虎之助（島田正吾）に学ぼうと江戸へ向かうが、お松と出会い、恋に落ちる。兵馬は龍之助の行方を突き止め、果たし状を送りつける。兵馬に討たれてくれと龍之助に頼むがお浜だったが、龍之助はお浜を斬り、江戸を後にして京都へ入る。途中、お浜そっくりのお豊（中村玉緒）を助けた龍之助は、芹沢をたよって新選組に入り、兵馬もまた近藤の世話で新選組入りする…。かつて大河内伝次郎や片岡千恵蔵が演じた虚無の剣士・机龍之助役に市川雷蔵が挑んだ「大菩薩峠」三部作の第一作。大衆小説の名作として名高い中里介山の原作を衣笠貞之助が脚色、監督を三隅研次が務め、ロマン漂うキメ細やかな演出を見せる。雷蔵は、クールな持ち味を発揮し、妖剣「音無しの構え」をあやつり、行く先々で波乱を巻き起こす机龍之助役を見事に演じ切った。また中村玉緒が、お浜、お豊の二役を演じ、妖しい女心を振りまく。
故事发生在昭和初年，一群打扮神秘举止怪异的人在夜幕的笼罩下来到了帝都东京府，他们是世世代代都在追踪和狩猎吸血鬼的吸血鬼猎人。 尤里（上村佑翔 配音）虽然身处吸血鬼猎人的阵营之内，却是非常特殊的存在，因为他的体内流淌着人类和狼人的两种血液，因此拥有着比普通人类更为强健的体魄。威拉德（堀内贤雄 配音）拥有着丰厚的学识，是军师和领袖般的存在。多萝西娅（森奈奈子 配音）外表火辣，却拥有着截然相反的冷静头脑，无论怎样紧要的危机时刻都能做出正确的判断。菲利普（小林裕介 配音）年纪虽小，却拥有着极为复杂的过去。
Zi-O使用变身腰带“时空驱动器”，并装上变身道具“驾驭表头”变身。而且，能透过获得蕴藏着历代平成假面骑士力量的驾驭表头，将其力量解放，便能够穿上各平成骑士的装甲。这样，能够使用全部平成假面骑士力量的Zi-O，简直就是拥有从2000年开始“平成假面骑士”20部作品力量的超级英雄！自此，平成最后一位假面骑士的故事开始了。
